厦门论文发表-细菌前体和不饱和长链脂肪酸是北大西洋深海演示海绵的生物标志物
· 安娜·德·克鲁伊弗
· 克拉斯·尼罗普
· 特蕾莎·摩根蒂
· 马蒂恩·巴特
· 比特·斯拉比
· 乌尔里克·汉兹
· 贾斯珀·德·戈伊
· 富鲁·米尼斯
· 杰克·米德堡
· 发布时间： 2021年1月27
· https://doi.org/10.1371/journal.pone.0241095
抽象
海绵产生独特的脂肪酸（FAs），（可能）可用作化学轴学和生态生物标志物，用于研究内源性宿主相互作用和海绵的功能生态学。在这里，我们介绍了五个共同的栖息地建设深海海绵（类德莫蓬吉亚，秩序特拉特蒂内利达），这是被列为高微生物丰度（HMA）物种的FA配置文件。吉奥迪亚·亨切利帕尔瓦， G.大西洋，G.巴雷蒂和斯泰莱塔·拉菲迪奥波拉是从北大西洋的北大西洋和北极海绵地采集的。细菌法斯在所有五个物种中占主导地位，特别是中链分支FAs（MBFAs、8-和9-Me-C）的异位混合物16:0和10-和11-我-C18:0）被发现在高丰度（加起来≥20%的总FAs）除了更常见的细菌标记。此外，海绵还生产出长链线性、中线性和a（i）分支不饱和性FAs（LCFAs），链长为24°u201228 C原子，主要具有典型的Δ5,9不饱和，虽然Δ9,19和（尚未描述）Δ11,21也发现了不令人满意的问题。G.帕瓦和S.拉菲迪奥波拉各自产生了不同的LCFA，而G.大西洋，G.巴雷蒂和G.亨切利生产了类似的LCFA，但比例不同。不同的细菌前体在碳同位素组成上各不相同（δ13C），与其他细菌（线性和（i）分支的FAs相比，MBFA更加丰富。我们建议生物合成途径，以不同LCFA从他们的细菌前体，这是符合在LCFAs中发现的小同位素差异。事实上，深海海绵的FA轮廓可以作为化学轴学标记，并支持海绵从其内生菌中获取积木的概念。
引文： de Kluijver A， 尼罗普 KGJ， 摩根蒂 TM， 巴特 MC， 斯拉比 BM， 汉兹 U 等人 （2021） 细菌前体和不饱和长链脂肪酸是北大西洋深海演示海绵的生物标志物。PLoS ONE 16（1）：e0241095。https://doi.org/10.1371/journal.pone.0241095
编辑：克拉拉·罗德里格斯，阿韦罗大学，葡萄牙
收到：2020年10月6日：接受：2020年12月18日：已发布：2021年1月27日
版权所有：2021年?德克鲁伊弗等人。这是一个开放访问文章，根据《知识共享归属许可证》的条款分发，允许在任何媒体上不受限制地使用、分发和复制，前提是原始作者和来源得到记分。
数据可用性：所有相关数据均在手稿及其支持信息文件中。
资金：这项研究是在欧盟海绵项目范围内进行的，该项目根据第679849号赠款协议从欧盟的Horizno 2020研究和创新方案获得资金。本文件仅反映作者的意见，中小企业执行机构（EASME）不负责对所包含的信息的任何使用。进一步的支持包括ERC开始向J.de Goeij博士提供第715513号赠款协议.M，荷兰地球系统科学中心向J.J.米德堡教授提供赠款。F. Mienis博士得到荷兰科学研究组织创新研究奖励计划（NWO-VIDI赠款第0.16.161.360号）的支持。额外资金来自不来梅大学的DFG卓越集群"地球系统的海洋"（第49926684号赠款）和ERC Adv Grant ABYSS，这两个基金都来自安杰·博蒂乌斯教授（第2厦门论文发表-94757号赠款）。资助者在研究设计、数据收集和分析、出版决定或编写手稿方面没有作用。
竞争利益：作者宣称不存在相互竞争的利益。
介绍
海绵是几乎所有水生生态系统（包括深海[1]）的丰富居民。它们是具有独特特征的嵌套过滤器喂料器，例如它们巨大的过滤能力及其与密集和多样化的（海绵特异性）微生物群落（海绵特异性）[2，3]的共生，有助于它们在几乎所有深度和纬度上茁壮成长的能力。内膜，可以占据海绵体积的>50%[4]，作为海绵的能量来源，并提供一个多样化的代谢物和代谢通路托盘，有利于海绵（审查在[2]）。海绵及其内质同质体产生的一类突出的代谢物是脂质。对海绵的脂质分析始于20世纪70年代[5、6]，由脂肪酸（FAs）的多样性和独特结构激发，其中存在广泛的评论[7-9]。海绵的特点是存在不寻常的多不饱和，长链（≥24碳（C））FAs（LCFAs），具有典型的Δ5,9不饱和（称为"脱振酸"，因为它们在演示波氏体[5，10]中首次发现）。这些LCFA是海绵膜磷脂（PLs）的重要组成部分，可能起到结构和功能作用[11]。海绵，由于其内分泌物，富含细菌性FAs与高多样性，不仅包括常见的等位素（i）和前科（a）分支的FAs，而且更不寻常的。典型的演示海绵是大量中链分支 FAs （MBFAs），这些 FAs 被认为是由海绵特异性桉菌[12]产生的，并且存在分支的 LCFA[12，13]。由于分支假设是由微生物而不是海绵宿主引入的，分支LCFA的存在提供了关于内分泌物和宿主之间生物合成相互作用的信息[12，14]。莫诺尼奇法，例如.C16:1ω7，丰富的细菌[15]，已被确定为LCFA的前体与ω7配置[16]。因此，不饱和的位置也为细菌-宿主生物合成相互作用提供了见解。
此外，海绵FA的组成可能具有分类价值，至少在更高的分类水平（例如.class水平），因为德莫斯蓬吉亚，六氯苯二角（'玻璃'海绵），卡尔卡雷亚和人形体有明显的FA配置文件[17]。然而，较低分类级别的化学轴经济学值是有争议的，因为组成可能会随着环境条件而改变[18]。海绵的FA成分，特别是结合（自然丰度）稳定的同位素分析，已经显示出一个有价值的工具，推断海绵的饮食信息，如喂养珊瑚粘液[19]，浮游植物[20]和甲烷固定内膜[21]。
北大西洋是广阔的海绵地的家园，沿着大陆架、海山和深渊平原（22，23）广泛存在海绵地。Geodiidae和其他海绵物种的秩序特特拉蒂内利达（类演示）是这些海绵的理由的主要成分，占海绵地面底栖生物量的>99%[23-25]。Geodiidae spp.是高微生物丰度 （HMA） 海绵，它们含有丰富、多样化和特定的微生物群落（细菌和古生物），参与多个生物地球化学过程，如G中所示。巴雷蒂[26]。这反映在G的足协组成中。以细菌法斯[12]为主的巴雷蒂， 包括占总法斯 [12]28%的独特 Mbfas 。然而，其他地理迪达的足协档案还没有在文献中描述。
在这项研究中，我们分析了五个常见的深海特特拉蒂内利德的FA概况，这些特征来自北大西洋不同温度的组合：北极海绵地面组合，可容纳G。帕尔瓦， G.亨切利和斯特拉塔·斯普（如S.哈菲迪奥波拉）居住在温度低于3\u20124°C，和北部组合容纳G。巴雷蒂和G.大西洋等，通常发现温度在3°C以上[23，27]。基于LCFA中的化学结构和分支的存在，我们提出生物合成途径，并表明这些途径与C同位素（δ13C） LCFA 和细菌前体的签名。作为LCFAs前体的前体的高丰度内膜标志表明，这些深海海绵使用其内膜作为代谢源。
方法
海绵系列
在不同的科学考察中，在北大西洋由遥控飞行器（ROV）和箱芯收集，在北大西洋收集了德莫斯蓬吉亚类（Tetractinellida）类常见的生境建造海绵。G. atlantica （n = 2） 标本于 2017 年 8 月与挪威研究船 G.O. Sars （64°42'N 7+59'E） 一起在苏拉礁上采集，深度为 266+2012295 米。G.巴雷蒂（n = 6） 个人在 2018 年 8 月 G. O. Sars 探险中从巴伦支海 （70°47N 18+03'E） 获得约 300 米水深 [2018 年 8 月 [28]。挪威的研究考察不需要在该地区采集样品的特别许可证。在同一次探险中，G.亨切利， G.帕尔瓦，斯特莱塔拉菲迪奥罗拉（所有n = 1） 收集在 550\u2012600 米深度舒尔茨银行 （73°50°N， 7°34°E）[29]。G.亨切利（n = 3）， G.帕尔瓦（n = 3） 和S.2016年10月，德国研究船"极地"号（AWI远征PS101）在距离朗塞斯岭690~u20121000米深度的北极探险中检获了哈菲迪奥波拉（n =2）标本。 位于永久覆盖的北极中部（从 87°N， 62°E 到 85°55'N 57°45'E）。在国际水域采集样品不需要特别许可证。在G.O.Sars探险期间采集的海绵立即在船上被解剖，从朗塞斯岭采集的海绵被冻结在-20°C，并在实验室中被解剖（冷冻）。来自单个海绵随机部分的子采样（n = 3）被冷冻干燥，研磨以获得细粉末。舒尔茨银行和巴伦支海的海绵粉状子样本被混合，以获得具有物种代表性的样本，同时对海绵内部的亚样本进行了分析，以了解朗塞斯岭样本。朗塞斯岭的代金券标本存放在挪威卑尔根大学。G的凭证标本。巴雷蒂和G.大西洋储存在荷兰阿姆斯特丹大学，舒尔茨银行的凭证标本存放在荷兰特塞尔的荷兰海洋研究所。
脂质提取和 FAME 准备
每次提取时，每块海绵的海绵粉量约为100毫克。海绵脂被提取与修改的布莱和戴尔协议[30]，这是在 NIOZ 耶塞克[31-33]开发.由于毒性较低，我们调整了此协议，用二氯甲烷 （DCM） 取代氯仿。整个协议可在线获得：dx.doi.org/10.17504/protocols.io.bhnpj5dn。简言之，海绵组织样品在滚筒桌上用溶剂混合物（15 mL甲醇、7.5 mL DCM 和 6 mL 磷酸盐 （P）缓冲器 （pH 7–8） 提取至少 3 小时。通过添加 7.5 mL DCM 和 7.5 mL P 缓冲器实现了层分离。已收集 DCM 层，其余解决方案已用 DCM 第二次清洗。合并后的 DCM 分数被蒸发以获得总脂质提取物 （TLE），随后进行了称重。TLE 的一个别名通过激活的二氧化硅柱被分成不同的极性类。TLE 首先用 7 mL DCM（中性脂质）进行稀释，然后是 7 mL 丙酮（糖脂）和 15 mL 甲醇（磷脂）。用于进一步分析的磷脂 （PL） 部分使用碱甲基化 （使用甲醇中的甲氧氧化钠与已知δ转化为脂肪酸甲基酯 （FAMEs）13C）. 建议对复杂的脂质混合物进行碱性甲基化[34]。甲基化后，法米被收集到六烷中，并浓缩到~100微L六烷用于气相色谱 （GC） 分析。
在这项研究中，每个物种选择两个单独的海绵样本进行详细分析。FAME 样本的阿里报价用于使用二甲基二硫化物 （DMDS） 去皮化[35]进行双重债券鉴定。样品在 50 °C、50μL DMDS 和 10 μL 60 毫克/mL I 中隔夜反应在 40°C2.通过添加 200 μL 六烷和 200 μL Na 来阻止反应2S2啊3.收集了六烷层，用水相用六烷洗了两次。合并的六烷部分燥，随后在一个小纳上擦干2所以4在DCM中使用的列：甲醇（9：1）去除任何水，并在GC-vial中重新溶解在六烷中，用于GC分析。另一个FAME样本的引用用于使用亚当斯催化剂（PtO）催化氢化进行甲基分支鉴定2）和氢气。每个 FAME 样本，溶解在 ~3 mL 乙酸乙酸酯中，10-30 毫克 PtO2和一滴醋酸，用氢气冒泡至少1小时，之后反应小瓶被关闭，并在室温下搅拌过夜。随后，在由 MgSO 组成的小柱子上对每个样本进行了纯化4（底部） 和娜2CO3（上图）使用DCM，在乙酸乙酸乙酸乙基中重新溶解后进行分析。
名气分析
用火焰电阻探测器 （FID） （HP 6890 系列） 在气相色谱仪 （GC） 上对法米进行分析，以进行浓度和 GC 质谱测量 （MS） （芬尼根跟踪 GC Ultra）， 以在非极性分析列 （安捷伦， CP-Sil5 CB; 25 m x 0.32 mm x 0.12 μm） 上进行识别。样品被冷落。GC 烤箱的编程速度为 70°2012130°C，最低为 20°C，随后为 4°C/min 至 320°C，其保持 20 分钟。GC–FID 的运行压力为 100 kPa，而 GC–MS 的运行速度为 2.0 mL min-1.MS 以全数据采集模式运行，扫描m/z 50–800 中的离子。这13C/12通过分析 GC 燃烧同位素比质谱仪 （IRMS） 上的重复样本，确定各个 FAME 的 C 同位素比率，该质谱仪由 HP 6890N GC （惠普） 组成，通过 III 型燃烧接口 （热芬尼根） 连接到 Delta-Plus XP IRMS，使用与 GC-MS 相同的 GC 列和设置。
保留时间根据 C 的保留时间转换为等效链长度 （ecl）12:0， C16:0，和C19:0家庭。C19:0FAME还用于量化单个FAME的浓度（微克g）-1DW）[36]。δ13GC-C-IRMS 获得的 C 值已更正甲基化剂添加的 C 原子。这些数据在 R[37]中用 R 包 RLims[36]进行分析和绘制。
结果
G的脂质产量。巴雷蒂， G.亨切利、格帕瓦和S。嗜血杆菌相似，大约是干重的2-3%（DW）。只有G.大西洋的脂质产量较低，约为DW的1.6%。PL 衍生的 PL （PLFA） 配置文件类似于 TLE 的配置文件，大多数 FA 似乎都存在于PL（S1 表，[38] 中）。估计PLFA总含量为6.7±6.3毫克g-1DW （0.7%）（n=16，跨越所有物种）。使用 TLE 进行识别比较困难，因为 LCFA 与固醇共同使用，因此 PLFA 色谱用于识别和组成分析。
鉴定
单个 FA 的化学结构通过保留时间 （ecl）、解释其质谱和/或使用 NIST 库进行识别来识别。这些分配通过参考混合物（西格玛·奥尔德里希的细菌和一般FA混合物）和文献比较（例如NIOZ耶塞克[31]的参考ecl列表）进行了验证。
FA 以 ω 和Δ （IUPAC） 注释的形式呈现，以避免不含糊性，并以混合形式呈现，这是海绵 LCFA 注释的典型[17，39]（表 1）。不饱和被描述为 Cx：y， 其中 x 是 C 原子的数量， y 是双键的数量， 其次是Δ和所有双债券头寸从卡盒酸结束在Δ符号， 和甲基 （终端） 的第一个双债券的位置结束在 ω 符号 （表 1，图 1） 。根据IUPAC符号的甲基分支被描述为y-Me-Cx， y 是从车箱酸末端分支的位置， x 是骨干处的 C 原子数， 不包括分支 （图 1） 。ω符号遵循IUPAC的MBFAs术语，但偏离了最终分支的FAs。倒数第二个（ω2）和倒数第二个甲基分支（ω3）用ω符号描述为等离子（i-C）x）和前人（a-C）x其中 x 是 C 原子的总数，包括分支（表 1，图1）。
· 原始图像
FA 名称以 ω 和Δ符号和混合形式命名，具有相应的总 C 原子 （C） 和等效链长 （ecl）。FA 类别与图2的类别匹配。仅显示具有丰度≥1%的 FAs（至少在一个物种中）。粗体数字≥总FA的10%。
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0241095.t001
极性列上的排列顺序由靠近功能组的甲基分支的 FAME 组成，首先进行，然后是末端（倒数第二个）分支等位（ i ，ω1）和笔倒数第二个前兆（ a ，2ω） FAME ，最后是不饱和的 FAME ，其中最接近功能组的不饱和度首先被清除。分支不饱和的FAMEs在分支直FAM和直FAME之前，最后用相同的C数字（图2，表1）。
图 2.从演示海绵G中提取的 FAME 分数的 GC 跟踪。来自朗塞斯岭（北极中部）的亨切利。
LCFA 等位素经常共同稀释或至少没有很好地分开，如 C 的 PLFA 配置文件所示26:2Δ5,9和C26:2Δ9,19.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0241095.g002
分支的位置也用MS光谱得到验证，因为i分支的特点是更强烈的[M-43]碎片离子和A分支的特点是[M-57]的升高碎片离子。通过类似于[12]的诊断质量片段确定饱和 MBFA 中的甲基分支位置。m/z 171、185、199 和 [185]213 的相对强度用于识别 8、9、10 和 11-Me 分支的相对贡献（S1 表）。由于 11-Me 分支产生 m/z 185 和 213 的等等片段，因此 m/z 185 （213–185） 的超额片段是由 9-Me 分支（S1 表）[12]产生的。在未饱和的 MBFA 中，使用类似的诊断片段和饱和的 FAME（S1 表） 进行分支。++
使用 DMDS 进行治疗后，对不饱和位置进行了识别，DMDS 与单不饱和的 FAMEs 直接进行。然而，对于多不饱和的FAME，由于 S（-Me） 广告的多种可能性，与 DMDS 的识别变得复杂。The Δ5,9不饱和，典型的海绵LCFAs，在C形成循环硫化物6和C9位置与甲基锡奥组在C5和C10与DMDS脱毛后的位置。此外，产品由 C 的甲基锡欧组组成5和C6和C的（未反应的）双重债券9和C10反之亦然[40]。这对于识别典型Δ很有用5,9配置在海绵[41]。当不饱和是相距甚远时，即位置Δ9,19和Δ11,21，两种双键都转换为二甲基二硫化物介导体（质量谱的S1无花果）。基于 ecl 和 DMDS 和氢化的组合，我们确定了分支单体和死气酸 FAs。
脂肪酸成分
北极物种（G.亨切利， G.帕尔瓦， S.哈菲迪奥波拉）舒尔茨银行和朗塞斯岭有一个类似的PLFA配置文件（S1表），所以我们汇集了来自两个位置的组成数据（表1）。这些数据标准化为 PFA 总量的百分比（以下简称 FAs），以便于比较，但实际 FA 浓度 （μg g）-1DW）可在S1 表中找到。
细菌脂肪酸。
细菌性FAs，包括分支和单一的FAs，链长，n = 19）（表1，图3），最多可代表79±2%（在S。哈菲迪奥波拉）。
细菌法（蓝色）、海绵LCFAs（橙色）和其他FAs（绿色）对每个物种的总PLFA的平均贡献（缩写为表1）。
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0241095.g003
MBFAs主导了所有深海演示海绵物种的FA配置文件（表1，图2），其中最丰富的是Me-C18:0（12+23%，表1），分支在9，10，11，占优势的位置11（m/z [213×185];平均49%），其次是位置10（m/z 199;平均37%）。 第二最丰富的法斯是梅 - c16:0（8~14%的足协，表1），分店在8、9、10、11，占9位（m/z 185：平均36%）和10（m/z 199：平均33%）。此外，我-C14:0，我-C15:0，和梅-C17:0存在，但在低得多的丰度（≤3%的总FAs为每个表1）。其他分支（饱和）FAs发现在所有演示，但不太丰富，包括i-C15:0（13-我-C14:0）和a-C15:0（12-我-C14:0），占每个FA总数的2-5%，和i-C17:0（15-我-C16:0）和a-C17:0（14-我-C16:0），每个（表1）的1%至2%不等。
在深海演示波格中发现了多个单体 FAs。最丰富的是C16:1（从 G 的 9% 不等。大西洋到14%在G。帕瓦和S.rhaphi二磷，由不同的异位体组成，双键为ω5、ω7、ω9和ω11位置。C 的伊索默斯18:1双债券在ω7，ω8，ω9，ω11，ω12，ω13，ω14和ω15职位占总FAs的4-7%。ω7不饱和度在C中占主导地位16:1和C18:1DA1.此外，罕见C16:1和C18:1在演示波格中发现了带有甲基分支的 FAs。C 中的主导不饱和16:1是 ω7 和氢化 FAME 样本表示i 分支：i-C17:1ω7（15-我-16:1Δ9）在北方物种中占4-5%（G.巴雷蒂， G.大西洋）北极物种<2%（G.亨切利， G.帕尔瓦， S.哈菲迪奥波厦门论文发表-拉）（图 1，表 1） 。C 中最丰富的不饱和度18:1法斯是 ω12 （Δ6）为G。帕尔瓦， G.亨切利和S。拉菲迪奥波拉和 ω14 （Δ4）为G。巴雷蒂和G.大西洋，和Me组是在链的中间，因为没有增加的峰值为i-和a-C19:0在相应的氢化分数中发现。中间我分支C18:1等位器（我-C18:1ω4和我-C18:1ω12）在所有演示海绵物种中被发现，范围在2-5%（表1）之间。此外，金额低（< 1%）C15:1和非分支C17:1被发现。
其他脂肪酸。
线性法主要为C14:0， C16:0和C18:0在所有物种（表1）。海绵只含有少量的 FAs，C 之间的链长20和C24，如C20:5ω3（<所有物种的1%）和C22:6ω3 （1.4 ± 0.9%， n = 8） 在北方物种G.大西洋和G.巴雷蒂和<1%的北极物种G。亨切利， G.帕瓦和S.拉菲迪奥波拉.
海绵脂肪酸。
LCFA （≥ C24），典型的海绵，每个物种不同，由24-29C原子组成（表1）。LCFA 代表 21 ± 6%（n = 19， 在所有物种中）， 贡献最高 （29%）在G.大西洋（图 3） 。演示波的最常见的不饱和是Δ5,9，但也不饱和在Δ9,19和Δ11,21被观察到。
· C25： 在G.占主导地位的 Lcfa 。帕尔瓦是23-我-C24:2Δ5,9 (i-C25:2Δ5,9），其次是22-我-C24:2Δ5,9 (a-C25:2Δ5,9），占15±1%的FAs。伊索默斯 23 - 我 - c24:1Δ17 (i-C25:1ω7）和（中）我-C24:1Δ17（我-C24:1ω7）存在于北方物种（G.大西洋和G.巴雷蒂）共代表 2 ± 0.6% （表 1）.
· C26： 在G.占主导地位的 Lcfa 。亨切利是C26:2Δ9,19，其次是C26:2Δ5,9，他们共同代表了该物种中14±6%的FAs。巴雷蒂和G.大西洋也合成了C26:2Δ5,9和C26:2Δ9,19按可比金额计算，G.加起来占11±1%。巴雷蒂和7%在G。大西洋。跟踪金额（<1%）C26:2Δ5,9在G.帕瓦和S.拉菲迪奥波拉.同样，C的微量26:2Δ11,21（<1%）是在G.帕尔瓦。
· C27：（中）我-C26:2Δ5,9北方物种丰富（G.巴雷蒂： 4 ± 3%：G.大西洋： 9%） 。也25-我-C26:2Δ5,9 (i-C27:2Δ5,9），和25-我-C26:2Δ9,19 (i-C27:2Δ9,19）是由北方物种生产的，加起来占G类动物总数的3±2%。巴雷蒂和5%在G。大西洋。由于这些峰值共同发音，单个浓度可能代表同位体混合物。G.亨切利拥有少量的 （中） Me - c26:2Δ5,9和25-我-C26:2Δ9,19 (i-C27:2Δ9,19）（<2%）。同样，S.拉菲迪奥波拉有低量的（中）我-C26:2Δ5,9和 （a）i -C27:2Δ5,9（共 2%，表 1）。
· C28： G.大西洋， G.巴雷蒂和G.帕瓦包含C28:2与Δ11,21配置，占1.8±1%的总FAs在G。巴雷蒂， 1.9% 在G.大西洋和3.6±1.7%。 帕尔瓦。R.嗜血性磷含有少量的 C28: 2Δ5,9（1.5 ± 0.4%）（表1） 。
· C29： 占主导地位的LCFA在S.拉菲迪奥波拉是 （中） - 我 - C28: 2Δ5,9贡献率为5.5±总FAs贡献率为0.6%（表1）。
稳定 C 同位素值 （δ13C）
· 稳定 C 同位素值 （δ13占统治地位的 FAs 的 C）范围在 -18 ‰ （95 百分位） 和 - 26 ‰ 厦门论文发表-（5 百分位） 之间，并在所有演示海绵（图 4， 表2）中表现出类似的模式。δ13占主导地位的 Mbfas 的 C 值， Me - c16:0，我-C18:0，还有我-C18:1ω12（和ω14）丰富13C 与其他细菌脂肪酸相比，（a （i）- C15:0， C16:1ω7， C18:1ω7）（图4，表2）。最耗竭的法是i -c17:1ω7 (-25.7 ± 1.3 ‰ δ13C）。 不同的LCFA异构体被分析为一体，因为异构体在GC（图2）上共同发音或至少没有很好地分离。但是，我们可以为（a）i-C分配单独的同位素值27:2 and Me-C26:2 (图4）。与细菌性FAs相比，LCFA显示的同位素变异较小，但仍在-25至-19‰（5-95百分位）（图4，表2）之间。梅 - c26:2和 （a）i -C27:2有相对相似的δ13C 值，-20 和 -21 ‰，在G. .巴雷蒂和G.在氢化样品中观察到-21和-24‰的更显著差异（每个物种1个），表明峰值重叠模糊了同位素值。
图4。δ13C 在分析演示波格中前体和主导 LCFA 的组成。
海绵物种被聚集在一起，中间点在框图中表示为黑线。这些数字描绘了样本大小（个人名声样本）。这些颜色用于将细菌前体 FAs 与海绵生成的 LCFA 进行匹配。粉红色用于（中）我分支的FAs，灰色用于线性法，蓝色和黄色表示（a）i分支的FAs具有独特的δ13C 可能最终在异位混合物中，由绿色表示（见图5，了解生物合成通路）。
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0241095.g004
下载：
·
讨论
细菌法斯
在分析的所有五个海绵物种中都发现了高浓度的MBFAs等位混合物，而与物种和位置无关（表1）。MBFAs的占主厦门论文发表-导位被认为是Demosponiae的一个典型特征，因为它在任何其他生物体、沉积物或水中都没有观察到[12，17，42]。分支的典型位置在 ω5 和 ω9[12]之间， 导致 8 - 和 9 - me - c 的主导地位16:0和10-和11-我-C18:0在这项研究中，与先前报告的MBFA[43，44]一致。MBFAs通常由细菌产生，因此它们大概是由独特和海绵特异性细菌共生体制成的。据推测，这些细菌在地质学上很普遍，是在现代海洋环境中独特的海绵宿主的保护环境中遗传的[8，12]。这一假设得到了Geodia sp.的基因组分析的进一步支持，揭示了地理变化很小的物种之间类似的微生物群落[45]。
MBFAs的候选植物是波里布菌，这是HMA海绵中独特而丰富的植物（46），因为MBFA浓度和波里巴菌丰度在几种海绵物种[44]之间发现了正相关关系。元基因组分析表明，波里布菌是G.巴雷蒂[47，48]，但很少， 甚至缺席在G.亨切利[49]， 这表明在G中也丰富的脂肪菌， 酸菌， 氯氟西和蛋白菌的统治地位.巴雷蒂[47，48]。这表明，MBFA要么属于上述植物之一，要么MBFA在微生物植物中共享，因为与基因组分析相比，MBFA的化学轴化学分辨率较低。在环境中，MBFA主要存在于氮和硫减少剂（化学异种）和氧化剂（化学自动营养素），它们大多是（大型）蛋白酶家族的成员[50-53]。氮、硫的减少和氧化过程是在深海海绵（如G）中进行的。巴雷蒂[26，54，55]和氧化过程与 CO 耦合2固定，虽然相关的CO2固定可能占深海海绵碳需求的10%<[56]。海绵中的毛躁菌也被描述为混合营养细菌，能够修复CO2使用古老的木材–隆达尔（反向乙酰-CoA）通路[57]。MBFAs中的同位素浓缩（图4，表2）同意先前对G的观察。巴雷蒂[58]，因此可能与氮和硫转化过程和潜在的 CO 有关2固定。这将是有趣的执行同位素跟踪研究[56]与13C-CO2评估CO2加入丰富的MBFAs，可能与硝化（或硫氧化）抑制剂结合，类似于Veuger等人[59]。
最耗竭的法（i- c）17:1ω7，图 4，表 2） 被认为是减少硫磺细菌脱硫的化学轴化学标记[60]。i-C之间的同位素差异17:1ω7和MBFAs表明，这些标记不是来自同一个微生物联合体。更普遍的细菌标记（例如（a）i-C15:0，典型的克阳性细菌和C16:1ω7和C18:1ω7，典型的一般克阴性细菌[15]有中度δ13C 值 （图 4，表 2）。这种值可能是来自不同途径的同位素平均值的结果，因为它们是更一般的细菌标记，或者它们可能代表有机物上的一般异质性，具有δ13C 值从 -24 到 -22 ‰在北极西部[61]。
具有 C 链长度的 FAs 贡献率低20到C24典型的浮游植物和浮游动物（例如.C20:5ω3和C22:6ω3） 表明，厦门论文发表- 下沉的动物园和浮游植物对海绵饮食贡献不大， 至少不是直接的。这些发现支持越来越多的证据表明，G.巴雷蒂（和其他北大西洋深海海绵）主要以溶解的有机物、中上层和相关细菌[62，63]为食。因此，部分细菌法可能来自中上层细菌，而不是细菌内膜，尽管与细菌共生体数量高（10）相比，这一贡献预计较低11细胞mL海绵-1[62]）。浮游植物标记在北方地理学（G.大西洋和G.巴雷蒂）与北极物种（表1）相比，可能与水深有关，因为从约300米和600米以下的北极物种中采集了北方物种，而环境因素，如永久冰覆盖（朗塞斯岭）和北极一般较低的初级生产，与北大西洋北部（64米）相比，可能起着主要作用。
细菌法斯（在所有五个分析的深海演示海绵物种中占总法斯总数的56-79%）的总体高丰度符合它们作为HMA海绵的分类，支持微生物内生体在海绵代谢中起关键作用的想法[2，3]。值得注意的是，内分泌体的贡献可能更高，因为没有通过（PL）FA分析[65]检测到古生物，同时在G中也发现它们非常丰富。巴雷蒂[47，48]。
海绵LCFA
虽然在研究的特特拉西内利德物种中，细菌FA特征非常相似，但海绵特异性LCFA成分更具有物种特异性。LCFA 的主要不饱和度是Δ的双倍不饱和5,9在所有被分析的物种中的位置，这是演示海绵的典型特征[5，10]。同样，线性 C26:2Δ5,9，（a）i-C25:2Δ5,9和/或i-C27:2Δ5,9，存在于所有分析的物种（图5，表1），是演示海绵的常见LCFA，（例如[17，39，66]，概述见[8]）。我们发现（中）我分支的Δ5,9除G.帕瓦（图 5，表 1） 厦门论文发表-。此外，蒂尔等人[17]在G.巴雷蒂和其他一些德莫斯蓬吉亚 （哈利洛纳sp.，彼得罗西亚sp.）， 但不是在所有分析德莫斯蓬吉亚。我们还确定了新的LCFA：i-C 27:2Δ9,19（在G.大西洋，G.巴雷蒂和G.亨切利）和Δ11,21在C26:2和C28:2 (巴雷蒂和G.帕尔瓦）。Δ的存在11不饱和（C）26:2Δ11,21和C28:2Δ11,21），通过DMDS脱毛识别，在海绵LCFA中并不常见。巴纳森等人[67]发现Δ11一系列单一FAs中的不饱和，包括C28:1，在热带演示海绵物种（订单阿西内利达），但没有与Δ的死气流长的LCFA11到目前为止，已描述了不饱和。配置表示Δ11脱盐酶可能活跃在这些物种中;然而，这种酶在海绵中的活性尚未报告。
·
图 5.在检查的特特拉蒂内利德物种中，建议将（微生物）前体的生物合成途径带到LCFA。
在研究的海绵中检测到的 FAs 以黑色矩形显示，实心箭头表示拉长，破折号箭表示Δ5,9不饱和。包含每个 LCFA 的物种都标明了表 1中的缩写名称，粗体名称意味着 LCFA 在该特定物种中占主导地位。
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0241095.g005
G.大西洋和G.巴雷蒂有几乎相同的LCFA配置文件（表1），表明这些物种可能是密切相关的，正如早些时候建议基于他们的固醇和氨基酸成分[68]，但偏离分子植物学，使他们进一步分开[27]。G的 FA 概况 。亨切利和G相似。巴雷蒂和G.大西洋和基于分子现象学，G。亨采利是G的姊妹物种。巴雷蒂。然而，G.与其他地理学、i-和a-C相比，帕瓦产生了不同的LCFA 25:2Δ5,9这个物种在植物学上也与其他地理学的片段[27]不同。（a）i 分支C 的主导地位25:2已发现在另一个地理迪达家族（吉奥迪内拉）[69]。最后，也S.拉菲迪奥波拉产生了一个独特的LCFA，我-C28:2Δ5,9， 一个 Lcfa， 已经描述了家庭的演示[13，43]。
阿特海绵地面的三个占主导地位的特拉蒂内利德（G.亨切利， G.帕瓦和S.拉菲迪奥波拉）产生不同的LCFA（表1），可以作为化学轴化学标记。这些海绵的形态非常相似，因此LCFA分析提供了识别每个物种的额外方法。此外，独特的LCFA可以作为营养标志，研究深海海绵在环境中的生态作用。没有发现北极特特拉蒂内利德LCFA成分的地理差异（S1表），表明环境对LCFA成分的影响有限，这是使用LCFA作为化学轴化学标记的先决条件。
突出海绵脂肪酸的生物合成通路。
在LCFA中识别分支可以识别其短链前体和生物合成途径。各种体内结合研究与放射性基板[16，39，66，70]证明， 海绵拉长 FA 前体， 在卡盒酸末端添加 2 个 C 原子， 在Δ5和Δ9（可视化在[10]），揭示 C16:0作为共同C的前身26:2Δ5,9，而C16:1ω7被确定为C的前体26:2Δ9,19 (图 5）.没有证据表明分支是由海绵引入的，所以i-和a-C15:0被确定为i-和a-C的前体27:2Δ5,9 (图 5）[39]，而我-C16:0已确定为Me-C的前体26:2Δ5,9和我-C28:2Δ5,9 (图 5）[13，16，71] 。最后，我们假设i-C17:1ω7是i-C的前身25:1ω7和i-C27:2Δ9,19在G.大西洋，G.巴雷蒂和G.亨切利（图 5） 。
应用于本研究表明，大多数LCFA可以通过既定途径与前体相连，具有假设的中间体，因为几乎没有发现任何可检测的丰度（图5）。细菌前体的C同位素差异（部分）反映在LCFAs的C同位素组成（图4，表2），尽管与前体相比，CFA中的C同位素差异并不明显。一种解释是，宿主使用C源的混合物来拉长LCFA的前体，同时方法学方面也可能有所贡献。（更长的）分析列可能有助于改善LCFA的分离。
图 5的构图显示在海绵脂研究中同时使用 ω 和Δ （和混合） 节点的好处。来自终端端的注释 （ω 和（a） i符号 （图 1）便于显示生物合成通路，因为这些位置不会随着拉长而改变 （图 5）。然而，典型的Δ5,9不饱和更方便显示与Δ注释，因为一个ω符号会随着不同的C链长度（图5）而改变。模棱两可产生于甲基分支的 ω 符号， 因为a （i）符号用于最终分支 FAs，并描述总 C 原子（包括甲基组），而"我符号"用于 MBFAs，并描述骨干（不包括甲基组）的 C 数，并计算从卡盒酸末端（而不是终端 （ω） 端（图 1）的分支位置。这可能会导致对总 C 数的混淆，而 C 数是纠正额外甲基组测量同位素值所必需的，以及不饱和（从骨干末端开始计数，不包括甲基组）和从 ω 转换为Δ符号 （图 1）的 ω 位置。我们添加了此讨论以创建意识，并建议在方法中包括符号的描述，并在使用符号样式的混合物时同时呈现两个命名。
结论
在这项研究中，我们确定了北冰洋-北冰洋深大西洋中突出的栖息地建设演示（订单Tetractinellida）的FAs。所有被调查的五个物种都主要含有细菌性FAs，特别是MBBAs（Me-C）的异位混合物16:0和我-C18:0）（合计>20%的FAs）。与线性和（前）异位分支的FAs相比，MBFA具有同位素丰富性。海绵生产的LCFA，链长为C24-C28是线性的，中和a（i）分支，主要是典型的Δ5,9饱和。他们还生产（尚未描述）分支和线性LCFA，并Δ9,19和Δ11,21不饱和，即i-C27:2Δ9,19， C26:2Δ11,21，和C28:2Δ11,21.G.帕瓦和S.拉菲迪奥波拉各自产生了不同的LCFA，而G.大西洋，G.巴雷蒂和G.亨切利有一个类似的LCFA配置文件，虽然每个物种有不同的主要。北大西洋深海演示海绵的典型 FA 轮廓可用作化学轴和营养标记。我们建议从其细菌前体中获取占主导地位的LCFA的生物合成途径，这些途径得到了LCFA中小同位素差异的支持，支持海绵从其内生菌中获取积木的想法。
支持信息
S1 无花果 -
显示 1/2： pone.0241095.s001.pdf
跳到无花果共享导航
1 / 2
下载
无花果份额
C 的 DMDS 行为的质谱26（a，b）和C28（c，d）Lcfa 与Δ9,19（a，c） 和Δ11,21（b，d） 不饱和。
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0241095.s001
（PDF）
此卓越文件包含脂肪酸数据 （μg g DW）-1和个别标本的相对丰度（%），在PL和TL中。卓越文件还包含我分支 C 的片段16和C18，氢化样品中饱和（分支和线性）法梅的相对位置和同位素数据。
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0241095.s002
（XLSX）
确认
我们感谢安杰·博提乌斯支持和推动这项研究并组织PS101。我们感谢PS101的船长和船员在海上给予的出色支持。我们感谢已故的汉斯·托雷·拉普（UiB）组织了G.O.Sars探险和出色的项目协调。我们感谢戴斯蒙德·艾夫廷的分析帮助。我们感谢硕士生吉多·盖耶尔、肖恩·霍特杰斯、大卫·兰克斯、地板威利和费姆克·范·达姆在实验室和分析方面所做的帮助。我们感谢伊娃·德·里杰、萨米拉·阿布萨拉和斯特凡·舒滕在协议制定方面所做的帮助。艾琳 · 里普斯特拉和沃尔克 · 蒂尔因在法身份识别方面提供帮助而得到承认。我们感谢彼得·范·里伊斯维克和马可·胡特卡默分享他们的分析知识和身份识别库。帕科·卡德纳斯因分享他的分类学知识而得到认可。我们感谢吉尔斯·巴纳森和一位匿名评论者对他们的建设性评论。
引用
00001. 1.范索斯特 Rwm， 布里 - 埃斯诺 N， 瓦切莱特 J， 多尔曼 M， 埃尔彭贝克 D， 德沃格德 Nj， 等等。海绵的全球多样性（波里菲拉）。普洛斯一号2012;7(4).下午：22558119
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00002. 2.泰勒 Mw， 拉达克斯 R， 斯特格 D， 瓦格纳 M. 海绵相关微生物： 进化， 生态学和生物技术潜力。微生物莫尔生物 Rev. 2007：71 （2）： 295-347.下午：17554047
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00003. 3.皮塔 L， 里克斯 L， 斯拉比 Bm， 弗兰克 A， 亨切尔 U.海绵全息眼镜在不断变化的海洋：从微生物到生态系统。微生物群。2018;6(1):46.pmid：29523192
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00004. 4.里贝斯 M， 希门尼斯 E， 亚赫尔 G， 洛佩斯 - 森迪诺 P， 迪兹 B， 马萨纳 R 等。与温带海洋海绵相关的微生物的功能趋同。环境微生物。2012;14(5):1224–39.下午：22335606
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00005. 5.利奇菲尔德 C， 格林伯格 Aj， 诺托 G， 莫拉莱斯 Rw 。类演示孢子海绵中的 C24-C30 脂肪酸含量异常高。血脂。1976;11(7):567–70.下午：948253
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00006. 6.莫拉莱斯RW，利奇菲尔德C.不寻常的C24，C25，C26和C27多不饱和脂肪酸的海洋海绵微西纳增殖。生物奇姆生物物理法塔， 脂质脂质元。1976;431:206–16.pmid：938649
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00007. 7.罗德基纳萨。海洋海绵的脂肪酸和其他脂质。罗斯 J Mar Biol. 2005;31：S49–60.
· 查看文章
· 谷歌学者
00008. 8.雷赞卡T，西格勒K.奇数非常长链脂肪酸从微生物，动物和植物王国。普罗格脂质 Res J. 2009;48 （3–4）： 206–38.pmid：19336244
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00009. 9.米什拉下午， Sree A， 熊猫 P. 海洋海绵的脂肪酸。在： 金SK （eds）， 海洋生物技术的斯普林格手册.斯普林格柏林海德堡;2015. p. 851–68.
00010. 10.科恩普罗布斯特 Jm， 巴纳森 G. 演示酸重温。三月毒品。2010;8(10):2569–77.pmid：21116406
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00011. 11.劳森 MP， 汤普森 JE， 杰拉西 C. 细胞膜本地化长链 C24-C30 脂肪酸在两个海洋演示波格.血脂。1988;23(8):741–9.pmid：3185105
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00012. 12.蒂尔五世，杰尼施A，瓦海德G，莱文贝格A，雷特纳J，迈克尔斯W.中链分支烷基酸从"活化石"演示：与古代沉积脂的链接？组织地球化学。1999;30(1):1–14.
· 查看文章
· 谷歌学者
00013. 13.雷德斯托夫 D， 舒艾尔， 汤普森杰， 杰拉西 C. 海洋脂质生物合成研究。11.1 合成、生物合成和内部分支去皮酸、22-甲基-5、9-八角二甲酸的绝对配置。J 组织化学。 1987;52 （12）： 2337–46.
· 查看文章
· 谷歌学者
00014. 14.Bergé J-P，来自海洋生物脂质的巴纳森G.脂肪酸：分子生物多样性，生物标志物的作用，生物活性化合物，以及经济方面。马生物技术公司。2005;1:51–111.
· 查看文章
· 谷歌学者
00015. 15.泽勒斯 L. 磷脂脂肪酸配置文件在土壤微生物群落的选定成员。光化层。1997;35(1–2):275–94.pmid：9232001
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00016. 16.杰拉西 C， 林 Wk. 海绵磷脂。1991年，24年（3）：69-75。
· 查看文章
· 谷歌学者
00017. 17.蒂尔五世、布卢姆贝格 M 、赫夫特 J 、帕佩 T 、庞波尼 S 、里德 J 等人。最古老的甲基苯二甲基苯甲基苯二甲苯二甲基苯甲基苯二甲基苯二甲基苯纳图尔维森沙夫滕2002;89(2):60–6.pmid：12046622
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00018. 18.劳森 Mp， 伯格奎斯特 Pr， 坎比 Rc， 劳森 Mp， 拉维斯 A， 坎比 Rc 。脂肪酸成分和波里费拉的分类。生物化学 Syst Ecol. 1984;12 （1）： 63–84.
· 查看文章
· 谷歌学者
00019. 19.范杜伊尔 Fc， 穆德利 L， 纽兰 G， 范伊泽卢 L， 范索斯特 Rwm， 胡特卡默 M， 等等。珊瑚腔海绵依赖于珊瑚礁衍生的食物资源：稳定的同位素和脂肪酸约束。2011年3月：158（7）：1653-66。pmid：24391268
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00020. 20.南极海绵的Thurber AR.饮食：中上层微生物循环和底栖元祖食物网之间的联系。2007年3月：351：77-89。
· 查看文章
· 谷歌学者
00021. 21.鲁宾- 布卢姆 M、 安东尼 · Cp 、萨亚韦德拉 L 、马丁内斯 - 佩雷斯 C 、比尔格尔 D 、佩克曼 J 等人。甲烷的燃料：来自沥青渗水的深海海绵从甲烷氧化共生体中获得营养。伊斯梅2019;13:1209–1225.pmid：30647460
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00022. 22.克努德比 A， 肯辛顿 E， 穆里略 Fj 。模拟西北大西洋海绵和海绵地的分布。普洛斯一号2013;8(12):1–20.pmid：24324768
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00023. 23.克利奇加德 AB， 滕达尔 OS. 东北大西洋大型海绵大规模发生分布和物种组成。普罗格海洋人。2004;61(1):57–98.
· 查看文章
· 谷歌学者
00024. 24.库蒂 T， 班尼斯特 Rj， 福斯 Jh 。挪威北部大陆架深水海绵地的社区结构和生态功能。续货架 Res. 2013;69：21–30.
· 查看文章
· 谷歌学者
00025. 25.穆里略· Fj、 穆尼奥斯 Pd、 克里斯托博 J、 里奥斯 P、 冈萨雷斯 C、 肯辛顿 E 等人。佛兰芒帽、佛兰芒山口和纽芬兰大岸（西北大西洋）的深海海绵状场地：分布和物种组成。马比奥雷斯 2012：8（9):842–54.
· 查看文章
· 谷歌学者
00026. 26.霍夫曼 F， 拉森 O， 蒂尔 V， 拉普 Ht， 帕佩 T， 迈克尔斯 W， 等等。海绵中的厌氧世界。地球微生物J.2005：22：1+10。
· 查看文章
· 谷歌学者
00027. 27.卡德纳斯 P， 拉普 Ht， 克利特加德 AB， 最佳 M， 索莱森 M， 塞切尔滕达尔 O. 分类学， 生物地理学和 Dna 条形码的地理迪亚物种 （波里费拉， 德莫斯庞吉亚， 特拉特蒂内利达） 在大西洋北北极地区。祖尔 J 林恩袜队 2013;169 （2）： 312–61.
· 查看文章
· 谷歌学者
00028. 28.巴特 · 麦克、德 · 克鲁伊弗 A、霍特杰斯 S 、阿布萨拉 S 、穆勒 B 、拉普 · 赫特等人。深海海绵及其微生物共生体对溶解和颗粒有机物的微分处理。科学代表 2020;10：17515.pmid：33060808
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00029. 29.罗伯茨 Em， 米尼斯 F， 拉普 Ht， 汉兹 U， 迈耶 Hk， 戴维斯 Aj 。北极海绵地面的海洋学设置和短期环境变化。深重物第一部分海洋人雷斯帕普。2018;138:98–113.
· 查看文章
· 谷歌学者
00030. 30.布莱格， 戴尔 Wj 。一种快速的脂质提取和纯化方法。J 生物化学物理 1959：37 （8）： 911–17.pmid：13671378
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00031. 31.库普曼斯 M， 范里伊斯维克 P， 马腾斯 D， 维菲尔斯 Rh 。海绵中脂肪酸和稳定碳同位素的季节性变化作为营养指标：确定海绵中的生物标志物。马生物技术。2015;17(1):43–54.下午：25107690
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00032. 32.里克斯 L， 德戈伊 Jm， 穆勒 Ce， 斯特鲁克 U， 米德堡 Jj， 范杜伊尔 Fc， 等等。珊瑚粘液为温暖和冷水珊瑚礁生态系统中的海绵环提供燃料。科学代表 2016;6：18715.pmid：26740019
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00033. 33.博施克 Hts.连接微生物群落结构和功能：稳定同位素（13C） 结合 PLFA 分析进行标记。在： 科瓦尔丘克 GA， 德布鲁因 FJet al. （eds）， 分子微生物生态手册.第二版。克鲁尔学术出版商;2004. p. 1673-88.
00034. 34.克里斯蒂 · 沃准备脂肪酸的酯衍生物用于色谱分析。阿德夫利皮德方法。1993;69–111.
· 查看文章
· 谷歌学者
00035. 35.尼科尔斯PD，古克特JB，白DC。通过毛细管GC-MS的二甲基脱硫剂介导剂确定微生物单一栽培和复杂配偶的单饱和脂肪酸双键位置和几何形状。J 微生物方法。1986;5(1):49–55.
· 查看文章
· 谷歌学者
00036. 36.索泰尔特 K， 教务长 P， 范里斯维克 P. Rlims： 使用 Gc - fid 和 Gc - c - irms 进行实验室分析的 R 功能。2015.
· 查看文章
· 谷歌学者
00037. 37.R 核心团队。R：统计计算的语言和环境。统计计算的R基础。2019.厦门论文发表-
00038. 38.帕尔扎尼尼 C， 帕里什 CC， 哈梅尔 JF， 美世 A. 功能多样性和营养含量在深海动物组合通过总脂质， 脂质类， 脂肪酸分析.普洛斯一号2018;13(11):1–22.
· 查看文章
· 谷歌学者
00039. 39.卡巴莱拉 N， 汤普森杰， 阿亚诺格鲁 E， 杰拉西 C. 海洋脂质生物合成研究。5. 海洋海绵中长链支流脂肪酸的生物合成。J 组织化学。 1986;51 （14）： 2751–6.
· 查看文章
· 谷歌学者
00040. 40.文森蒂 M， 古格利梅蒂 G， 卡萨尼 G， 托尼尼 C. 通过二甲基二硫化物衍生物的质谱测量确定二元饱和化合物中的双键位置。肛年化学 1987;59 （5）： 694–9.
· 查看文章
· 谷歌学者
00041. 41.卡巴莱拉NM，沙拉比F.不寻常的脂质在加勒比海绵安菲梅登维里迪斯和德斯马普萨姆马锚塔。J 纳特普罗德 1994：57 （8）： 1152–9.pmid：7964797
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00042. 42.吉兰英国《金融时报》、斯托伊洛夫 IL 、汤普森 JE、霍格 RW、威尔金森 CR、杰拉西 C. 脂肪酸作为海绵细菌共生体的生物标志物。血脂。1988;23(12):1139–45.pmid：2906395
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00043. 43.内切夫 J， 克里斯蒂 Ww， 罗巴伊纳 R， 迭戈 F， 波波夫 S， 斯特凡诺夫 K. 利皮德组成海绵维隆吉亚航空磷从加那利群岛。欧元 J 利皮德科学技术 2002：104 （12）： 800–7.
· 查看文章
· 谷歌学者
00044. 44.霍奇穆特 T、 尼德克鲁格 H、 格纳特 C、 西格尔 A、陶迪安 S、普拉策 M 等人。将海洋海绵中的化学和微生物多样性联系起来：毛菌作为甲基支状脂肪酸生产商可能发挥的作用。化学生物化学。2010;11(18):2572–8.下午：21077090
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00045. 45.舍特纳 S， 霍夫曼 F， 科尔德纳斯 P， 拉普 HT， 博提乌斯 A， 拉米特 A. 宿主植物学， 宿主类型和细菌社区多样性之间的关系在冷水珊瑚礁海绵.普洛斯一号2013;8(2):1–11.下午：23393586
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00046. 76M菲塞勒 L， 角 M， 瓦格纳 M， 亨彻尔 U. 发现在海洋海绵的小说候选人植物 "波里布细菌" 。应用环境微生物。2004;70(6):3724–32.pmid：15184179
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00047. 47.拉达克斯 R、 拉特泰 T、 兰森 A 、拜耳 C 、拉普 Ht 、尤里希 T 等人。海洋海绵Geodia Barretti的气象记录： 处理植物学及其微生物群落的功能。2012;14:1308–24.pmid：22364353
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00048. 48.卢特 · 赫姆， 班尼斯特 Rj， 瓦兰 S， 库蒂 T， 派恩达麦克， 韦伯斯特 Ns 。微生物群分析影响深海海绵的疾病乔治亚巴雷蒂。FEMS微生物生态 2017;93 （6）： 1–6.下午：28541458
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00049. 49.布施 K， 汉兹 U， 米尼斯 F， 穆勒 B， 弗兰克 A， 马丁罗伯茨 E， 等等。在巨大的肩膀上：海山如何影响海水和海绵的微生物群落组成。生物地球科学。2020;17(13):3471–86.
· 查看文章
· 谷歌学者
00050. 50.库尔 · 马克、 朱 B 、 里普斯特拉 · Wic 、 杰滕 ·Msm 、埃特威格 · 克夫、辛宁河 · 达姆斯特 · 杰斯。罕见的分支脂肪酸特征的脂质成分的有氧甲烷氧化剂"坎迪达图斯甲基米拉比利斯氧费拉。应用环境微生物。2012;78(24):8650–6.pmid：23042164
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00051. 51.克格 B， 尼科尔斯 Pd， 安特沃斯 Cp， 沙 W， 博克 E， 考克斯 Jc， 等等。产生酸的硫氧酸的极性脂质中的特征脂肪酸：甲氧西、环丙基、阿尔法-羟基-环丙基和分支和正常单酚脂肪酸。FEMS微生物生态 1986;2 （2）： 67–77.
· 查看文章
· 谷歌学者
00052. 52.施瓦布 Vf， 赫尔曼 M， 罗斯 Vn， 格莱克斯纳 G， 莱曼 R， 波纳特 G， 等等。基于PLFA和测序的方法推断出原始含水层中微生物群落的功能多样性。生物地球科学。2017;14(10):2697–714.
· 查看文章
· 谷歌学者
00053. 53.利普斯基 A， 斯佩克 E， 马科拉 A， 阿尔滕多夫 K. 亚硝酸盐氧化细菌的脂肪酸轮廓反映了它们的植物异质性。西斯特应用微生物。2001;24(3):377–84.下午：11822673
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00054. 54.霍夫曼 F， 拉达克斯 R， 沃布肯 D， 霍尔塔佩尔斯 M， 拉维克 G， 拉普 Ht， 等等。复杂的氮循环在海绵吉迪亚巴雷蒂。环境微生物。2009;11(9):2228–43.pmid：19453700
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00055. 55.拉达克斯 R， 霍夫曼 F， 拉普 Ht， 莱宁格 S， 施莱珀 C. 氨氧化古亚作为冷水海绵硝化的主要驱动因素。环境微生物。2012;14(4):909–23.pmid：22176665
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00056. 56.范杜伊尔 Fc， 伦格尔 Sk， 舒滕 S， 伦德尔夫 T， 范奥韦伦 D， 穆勒 Ce 。冷水珊瑚相关海绵海梅德斯米亚（斯蒂洛普斯）科里亚西亚（蒂斯勒礁，NE斯卡格拉克）将暗二氧化碳固定在磷脂衍生脂肪酸中。马比奥雷 2020;16 （1）： 1–17.
· 查看文章
· 谷歌学者
00057. 57.Siegl A, Kamke J, Hochmuth T, Piel J, Richter M, Liang C, et al. Single-cell genomics reveals the lifestyle of Poribacteria, a candidate phylum symbiotically associated with marine sponges. ISME J. 2011;5(1):61–70. pmid:20613790
· View Article
· PubMed/NCBI
· Google Scholar
00058. 58.Pape T. Lipidbiomarker Schwammassoziierter Bakterien Und Archaeen. Doctoral dissertation. University of Hamburg. 2004 Available from: https://ediss.sub.uni-hamburg.de/volltexte/2004/2112/
· View Article
· Google Scholar
00059. 59.Veuger B, Pitcher A, Schouten S, Sinninghe Damsté JS, Middelburg JJ. Nitrification and growth of autotrophic nitrifying bacteria and Thaumarchaeota in the coastal North Sea. Biogeosciences. 2013;10(3):1775–85.
· View Article
· Google Scholar
00060. 60.Boon JJ, De Leeuw JW, Van De Hoek GJ, Vosjan JH. Significance and taxonomic value of iso and anteiso monoenoic fatty acids and branched β hydroxy acids in Desulfovibrio desulfuricans. J Bacteriol. 1977;129(3):1183–91. pmid:845113
· View Article
· PubMed/NCBI
· Google Scholar
00061. 61.Griffith DR, McNichol AP, Xu L, McLaughlin FA, MacDonald RW, Brown KA, et al. Carbon dynamics in the western Arctic Ocean: Insights from full-depth carbon isotope profiles of DIC, DOC, and POC. Biogeosciences. 2012;9(3):1217–24.
· View Article
· Google Scholar
00062. 62.Leys SP, Kahn AS, Fang JKH, Kutti T, Bannister RJ. Phagocytosis of microbial symbionts balances the carbon and nitrogen budget for the deep-water boreal sponge Geodia barretti. Limnol Oceanogr. 2018;1–16.
· 查看文章
· 谷歌学者
00063. 63.巴特 M， 穆勒 B， 隆博茨 T， 范德文 C， 汤普金斯 G， 奥辛加 R， 等等。溶解的有机碳 （DOC） 对于平衡北大西洋深海海绵的代谢需求至关重要。林诺尔海洋人2020;1–14.
· 查看文章
· 谷歌学者
00064. 64.2007年以前，北冰洋欧洲区的主要生产和气候变异性：初步结果。极地生物 2010;33 （12）： 1641–50.
· 查看文章
· 谷歌学者
00065. 65.Koga Y， Morii H. 在古生物和进化考虑中乙醚型极性脂质的生物合成。微生物莫尔生物 Rev. 2007：71 （1）： 97–120.下午：17347520
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00066. 66.哈恩 S， 斯托伊洛夫 Il， 谭哈 Tb， 雷德斯托夫 D， 多斯加， 李 Ht， 等等。海洋脂质生物合成研究。17. 海洋海绵长链脂肪酸的链拉伸和脱饱和过程。J Am 化学公司 1988;110 （24）： 8117–24.
· 查看文章
· 谷歌学者
00067. 67.巴纳坦 G， 科恩普罗布斯特 Jm， 杜门克 P， 米拉莱斯 J.新的不饱和长链脂肪酸在磷脂从阿西内利达海绵特里肯特里翁爱和普塞达西内拉 cf.卢纳查塔。血脂。1996;31(2):193–200.pmid：8835408
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00068. 68.胡加德 L， 克里斯托弗森 C， 尼尔森 Ph， 克利特加德 A， 滕达尔 O。Geodia、伊索普斯和斯特里夫努斯物种的化学成分（乔里斯蒂达：德莫斯蓬吉亚：波里费拉）-一项具有一定分类意义的比较研究。生物化学 Syst Ecol. 1991：19 （3）： 223–35.
· 查看文章
· 谷歌学者
00069. 69.马卡里耶娃 Tn， 桑塔洛娃 Ie， 戈尔什科娃 Ia， 德米特罗克阿斯， 古齐阿格， 戈尔巴赫六世， 等等。一种新的细胞毒性脂肪酸 （5Z，9Z）-22-甲基-5，9-特拉科萨迪诺酸和来自远东海绵吉奥迪内拉的固醇。血脂。2006;37(1):75–80.
· 查看文章
· 谷歌学者
00070. 70.莫拉莱斯 RW， 利奇菲尔德 C. 合并14C-醋酸盐成C26脂肪酸的海洋海绵微小西拉增生。血脂。1977;12(7):570–76.pmid：27519846
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者
00071. 71.步行 Rd， 杰米森 Gc， 拉特克利夫 Mr， 杰拉西 C. 磷脂研究海洋生物： 2.1磷脂、磷脂绑定脂肪酸和海绵阿普利西纳拳头（帕拉斯）福马富尔瓦（帕拉斯）的免费固醇（=维隆吉亚蒂奥纳)2.孤立和结构阐明了前所未有的分支。血脂。1981;16(9):631–46.pmid：27519233
· 查看文章
· 酒吧/国家比
· 谷歌学者