免费医学论文发表-低成本有效的蚊子人工喂血装置“Caserotek”的评价

抽象

关于蚊媒生物学、病媒能力、杀虫剂抗性、传播和存活（使用标记-捕获-释放技术）的昆虫学研究通常依赖于实验室饲养的蚊子群落来产生大量持续饲养、老化和大小的蚊子。我们开发了一种低成本的血液喂养设备，使用资源匮乏环境中常见的材料，支持与温血动物一致的温度。我们将我们的系统（“Caserotek”）与Hemotek和玻璃/膜喂养方法进行了比较。对埃及伊蚊（林奈1762年）进行了两次实验，对达林按蚊（根1926年）（双翅目：Culicidae）进行了一次实验;每个实验进行3次重复。每周一次向埃及伊蚊雌性蚊子提供鸡血，持续30分钟（实验#1），持续14天或1小时（实验#2），持续21天。达令按蚊喂食一次1小时（实验#3）。在重复中计算血液喂养率、存活率和产卵量。Caserotek 的 30 分钟充血率 （91.1%） 明显高于 Hemotek （47.7%） 和玻璃喂食器 （29.3%），而对于 1 小时喂食，Hemotek 的充血率明显低于其他两种设备中的任何一种（78% 对 91%）。喂养装置的86天生存率相似，范围从99%到32%。与玻璃喂食器和Hemotek设备（每雌性21-22个卵）相比，Caserotek 喂食器（每只雌性 <> 个卵）的平均产卵量最高。我们新的人工喂养系统的血液喂养率明显高于更昂贵的人工系统，并且相当于其他健身参数。Caserotek 只需要使用聚苯乙烯泡沫塑料衬垫煮沸水以维持血液温度的能力。它可以很容易地扩展到大型生产设施，并在恶劣的条件下使用。

作者摘要

为了对蚊子进行研究，包括它们是否可以传播病毒，对杀虫剂有抗药性，它们能飞多远，以及它们能活多久，科学家们在实验室里饲养蚊子，它们必须给它们喂血才能产生大量类似大小的蚊子。我们开发了一种低成本的设备，该设备的材料在世界各地的大多数五金店都有售。我们将“Caserotek”与其他市售的血液喂养方法进行了比较，对埃及伊蚊进行了两次实验，对达林按蚊进行了一次实验。我们每周用鸡血喂食埃及伊蚊雌性蚊子一次，持续30分钟（实验#1），持续14天或1小时（实验#2），持续21天。我们喂食达令按蚊1小时（实验#3）。我们测量了蚊子以血液为食的程度（摄食率），血液喂养蚊子的存活情况以及蚊子产下了多少卵。埃及伊蚊喂食30分钟，在Caserotek上喂食最好（91.1%），而Hemotek和玻璃喂食器分别为47.7%和29.3%。当埃及伊蚊喂食1小时时，Caserotek和玻璃喂食器的喂食率良好（91%），但Hemotek的喂食率较低（78%）。喂养装置的86天生存率相似，范围从99%到32%。与玻璃喂食器和Hemotek设备（每雌性21-22个卵）相比，Caserotek 喂食器（每只雌性 <> 个卵）的平均产卵量最高。与其他更昂贵的喂食设备相比，卡塞罗泰克表现良好。Caserotek 只需要使用聚苯乙烯泡沫塑料衬垫煮沸水以维持血液温度的能力。它可以很容易地扩展到大型生产设施，并在恶劣的条件下使用。

数字

Table 3Fig 5图1图2表1Fig 3Table 2Fig 4Table 3Fig 5图1图2表1

引文： Astete H， Briesemeister V， Campos C， Puertas A， Scott TW， López-Sifuentes V， et al. （2023） 评估“Caserotek”是一种低成本且有效的蚊子人工血液喂养装置。PLoS Negl Trop Dis 17（8）： e0011563. https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0011563

编辑 器： 罗伯托·巴雷拉，疾病控制和预防中心，美国波多黎各

收到： 12年2023月31日;接受： 七月 2023， 25;发表： 2023月 <>， <>

这是一篇开放获取的文章，没有任何版权，任何人都可以出于任何合法目的自由复制、分发、传输、修改、建立或以其他方式使用。该作品在知识共享CC0公有领域奉献下提供。

数据可用性： 作者确认，研究结果背后的所有数据都是完全可用的，不受限制。所有相关数据均在论文及其支持信息文件中。用于数据分析的主要数据集在补充信息文件中提供。

资金： 这项研究由美国国家过敏和传染病研究所（NIH/NIAID）奖励编号P01 AI098670（TWS）资助。ACM获得美国国立卫生研究院国家过敏和传染病研究所的奖励U01AI151814的工资支持。军事传染病研究计划（MIDRP）提案U0501_17_AF_CS_OC提供了进一步的支持。资助者在研究设计、数据收集和分析、发表决定或手稿准备方面没有任何作用。

竞争利益： 提交人声明不存在相互竞争的利益。

介绍

关于媒介生物学、媒介能力、新型驱虫剂开发、杀虫剂抗性、传播和存活（使用标记-捕获-释放技术）的昆虫学研究通常依赖于实验室饲养的蚊子群落来生产大量健康、大小一致且年龄较大的蚊子[1]。雌性蚊子需要血粉才能产卵，因此需要血液来源来维持实验室中的菌落。尽管蚊子群落使用活体动物进行血液喂养;人工饲喂系统消除了与动物使用协议相关的行政和后勤负担，从而降低了研究成本[2]。有效的人工血液喂养系统必须在血管或基质中含有血液，同时通过膜（例如，动物组织、石蜡膜-M膜或胶原膜）为蚊子提供血液来源。此外，人工摄食系统必须调节血液温度，因为热量是蚊子用来定位宿主的主要线索之一[1，3]。在最近的综述中，已经描述了20多种蚊子装置[1，3，4]。两种最常用的系统包括由Rutledge等人首先开发的玻璃膜喂料器[5，6]和市售的Hemotek系统[7，8]。玻璃膜给料器的特点是耐热玻璃内室，周围环绕着圆柱形水套，入口和出口管连接到橡胶管，橡胶管保持恒温循环水（例如水浴），可与各种膜一起使用。多个玻璃喂食器可以连接到一个水浴，并且可以同时使用多个系统来增加一次喂食的蚊笼数量。Hemotek可以通过用电子设备加热血液同时喂养多达5-6个蚊笼，但成本可能高达3，000美元，而且使用起来既费时又麻烦[1，3，9]。我们开发了一种低成本的血液喂养设备，它不需要外部电源（如Hemotek或需要连接到水浴的玻璃喂食器）来将血液保持在与温血动物一致的温度。我们的设备使用资源匮乏环境中常见的材料，可以轻松扩展到大型生产设施。我们通过比较Hemotek和传统的玻璃/膜喂料系统来描述和评估我们的手工喂料系统“Caserotek”，这些喂料系统更昂贵且难以采购。这种新型产品可用于维持大量重要蚊媒的菌落。

方法和材料

昆虫

我们的实验是在秘鲁东北部洛雷托省亚马逊雨林（西经73.2'，南纬3.7°，海拔120米）内的伊基托斯市进行的。在两个昆虫设施中进行实验。第一个是在当地家庭中建造的野外昆虫，由加州大学戴维斯分校维护（图1），致力于正在进行的埃及伊蚊病媒能力研究[10]。一个区域被屏蔽成双入口，以防止蚊子逃逸，并包含一个用于调节房间温度的空调。第二个是海军医学研究单位第6号（NAMRU-6）伊基托斯昆虫设施，有一个达林按蚊殖民地，但有一些空间专门用于Ae。埃及伊蚊[11]。

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图1. 加州大学戴维斯分校野外昆虫。

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环境条件测量

用湿度计/温度计（托马斯可追溯湿度计/温度计，托马斯科学公司）测量每日最高和最低温度以及相对湿度。蚊子保持在27°C。 昆虫的窗户可以让自然光进入，室内灯每天从大约0800到1700打开，伊基托斯的光周期平均为12：12的光/暗（最小和最大日光之间的范围约为1小时）。伊基托斯市被热带雨林环绕，日平均气温25°C，年平均降水量2.7米。我们测量了每次喂食期间的温度和相对湿度。

蚊科

实验中使用的埃及伊蚊是在前面描述的加州大学戴维斯分校昆虫中饲养的，而安.达林吉在NAMRU-6昆虫场饲养。埃及伊蚊来源于幼虫，蛹来源于常规Ae。埃及伊蚊调查在实验前大约1个月进行，或使用放置在伊基托斯内十个地理上不同的社区的捕卵器收集的卵。让蛋纸干燥 1-2 天，然后在 2 周内存放在塑料容器中的自封袋中。将鸡蛋放入1L水/茶（柯林斯肉桂茶）输液中，在40°C下24小时。将幼虫置于装有26mL自来水的白色塑料锅（5.16×5.1000厘米）中。每天向幼虫提供小麦粉与商业鱼食混合的组合，直到化蛹。将蛹转移到1品脱塑料容器中，放在金属笼中并允许出来。因此，蚊子代表F的横截面0从田间收集的未成熟阶段的成虫。

对于使用 Ae 的实验。埃及伊蚊 共有100只雌性和50只雄蛹被放置在1加仑的塑料笼子里，从较大的金属笼子里蛹出现。这些笼子上盖着湿毛巾以保持湿度，但没有提供糖或水。使用三种不同的喂食器具向3-5天大的蚊子献血。喂食后，将方糖和水放在笼子的顶部，直到在第24天，第7天和第14天随后的血液喂食前约21小时。

实验中使用的达林按蚊来自F世代62来自NAMRU-6维持的菌落，其中随意向蚊子提供10%蔗糖溶液[11]。在喂食之前，将100只出苗后3-7天的雌性蚊子吸入并放入1加仑不含糖的塑料容器中约24小时。再次随意向笼子提供10%蔗糖溶液，直到24小时，然后为三个独立的蚊子队列提供一次血粉。

血

我们利用从当地屠夫那里收集的EDTA管中的鸡血，所有实验都可以购买血液。

卡塞罗泰克血液喂养装置的描述（图2和S1-S4)

该设备使用塑料尿液收集容器（85 mm x 64 mm）。一根塑料管（75毫米）穿过与盖子齐平的杯子底部，以便血液流向盖子顶部和10毫米盖唇之间的空间。在杯子底部切两个孔以添加热水（18毫米）并握住管子以倒血（10毫米）。杯子的内部衬有来自 8 盎司咖啡杯的聚苯乙烯泡沫塑料。特氟龙薄膜（水管工胶带）覆盖盖子的凸起边缘，在盖子顶部和特氟龙薄膜之间留出狭窄的空间。蚊子很容易通过薄膜进食。将热水放入杯中，然后将至少2毫升血液添加到管中。每20分钟更换一次热水。在喂食之前，我们的实验室技术人员用汗水擦拭暴露皮肤上的膜区域以刺激喂食。补充信息（S1文件）中提供了标准操作程序。

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图2. 卡塞罗泰克设备的描述。

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研究设计

我们对埃及伊蚊进行了两组实验，对达令按蚊进行了一组实验。在每个实验中，同时测试三个血液喂养装置（Hemotek，玻璃膜[3.8厘米外径]喂养器和Caserotek）。Hemotek和玻璃膜喂料器使用封口膜膜，而Caserotek使用特氟龙胶带作为膜。所有膜类型都用同一实验室技术人员的汗水擦拭以刺激喂养。每项试验包括三个重复。共有100只雌性和50只雄性从较大的金属笼中转移，蛹出现到1加仑的塑料笼子。这些笼子上覆盖着湿毛巾以保持湿度，但不提供糖或水。使用三种不同的喂食器具向三到五天大的蚊子提供鸡血。喂食后，将方糖和水放在笼子的顶部，直到随后的血液喂食前约24小时。

对于 Ae。埃及伊蚊实验（#1和#2），喂血持续时间，喂养次数，观察长度和卵子收集数量在实验之间有所不同;然而，在两个实验中，血液喂养率（充血蚊子）、存活率和产卵量在两个实验中都比较了不同采血设备。相比之下，对于安.在血餐后7天评估一次Darlingi实验，血液喂养率，卵孵化率和成虫出苗。下面我们描述各个实验的细节。

实验1（11年2017月2日至2017年5月30日，见S1图）：在第7、14和7天给予埃及伊蚊14分钟的血液，随后在第21、<>和<>天收集卵子以评估产卵量。喂血后，所有未喂食的雌性蚊子都被消灭。每天向蚊子提供产卵地点时，评估成虫死亡率。

实验2（16年2020月24日至2020年6月1日，见S1图）：在第7、14、21和7天给予埃及伊蚊14小时的血液，随后在第21、30、6和1天收集卵子以评估产卵量。蚊子在每个喂食日往返于加州大学戴维斯分校的野外昆虫场和NAMRU-5昆虫场。蚊笼在昆虫之间的运输在开始喂食前约6小时完成。将蚊笼放入装有湿纸巾的聚苯乙烯泡沫塑料冷却器中，转移到空调车上，驱车30分钟即可到达NAMRU-<>昆虫馆，在那里将笼子从与喂食器相同的房间的箱子中取出，让蚊子在献血前适应至少<>分钟。喂血后，所有未进食的雌性都留在笼子里。每天评估成人死亡率。

实验3（11年2018月22日至2018年7月1日，见S1图）：达令按蚊在第1天喂食<>小时;大约<>周后收集卵子。虽然无法准确计算总产蛋量，但评估了一部分种蛋的孵化率和成虫出苗率。

统计分析

为了确定肿胀率、每只雌蚊产卵量和存活率的差异，我们使用了方差分析（ANOVA）和SAS的一般线性模型程序（PROC GLM）[12]。为上述每个实验分别为每个因变量构建模型。模型中包含的自变量是实验的天/周（第1，7，14和21天），重复（A，B，C）和设备（玻璃喂料器，Hemotek或Caserotek）。我们还考虑了日*设备交互。最小二乘均值（LSMeans）用于检验主效应和相互作用项内平均率之间的差异;显著性水平根据预先计划的比较进行调整。在实验#1中，分析中删除了少于10只蚊子的数据点。有和没有所有数据点的分析的完整模型结果包含在补充信息（S2文件）中。

结果

实验 #1

喂食率。

在30分钟的喂血期间，雌性Ae。埃及伊蚊的摄食率在实验日和饲喂器具之间差异显著（P <0.0001，表1）。此外，还有显著的日*设备交互（p = 0.0031）;这些变量占GLM模型中数据变化的91%（R平方）（表1，S2文件的完整模型结果）。Caserotek 设备的充血率始终最高，所有日子的充血率为 >88%，最小二乘平均值为 91.4%（stderr = 3.6），而 Hemotek 和玻璃喂食器的充血率分别为 62.0% 和 50.0%（LS Means;p ≥ 0.0001）在第 1、7 和 14 天。玻璃喂料器和Hemotek设备在第1天的进料率明显低于其他日子（图3）。

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表 1. 完整的一般线性模型 （GLM） 结果，用于将蚊子暴露于血液中 30 分钟后，喂食日和设备对肿胀率的影响。

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图3. 埃及伊蚊实验 1 的按天和设备划分的交互作用图喂养速率。

闭合圆圈表示单个重复，而线表示平均饲喂速率。

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0011563.g003

产卵和存活。由于在提供血粉后，未喂食的雌性在实验#1中被移除，因此由于在Hemotek和玻璃喂食器中观察到较低的摄食率，因此每个设备/周/重复评估的产卵和存活率的蚊子数量并不均衡。例如，一个玻璃喂食器复制品在三个时间点上只剩下两只蚊子，而一个 Hemotek 重复品只有 14 只蚊子。卡塞罗泰克的平均充血蚊子数量为83只（范围，64至97只），Hemotek为28只（范围，14至36只），玻璃喂食器只有16只（范围，2至31只）。玻璃喂食器每只充血雌性的平均产卵数最高（58.9±42.4），其次是Hemotek（36.3±12.2），最后是Caserotek（27.9±8.1）;这些差异无统计学意义（p = 0.11，S2文件）。充血蚊子的存活率没有统计学差异，范围从使用Hemotek的84.4%（±8.8%），玻璃喂食器的89.0%（±11.8%）和Caserotek的90.1%（±5.5%）（p = 0.81，S2文件和S8图）。

实验 #2

喂食率。

在雌性 Ae 的 1 小时喂血期间。埃及伊蚊，实验日和饲喂装置的摄食速率差异显著（P <0.0001，表2，S2文件）。此外，还有显著的日*设备交互（p<0.0001，表2）;这些变量占 GLM 模型中数据变异的 95%（R 平方）。在第58、7和14天，第一次饲料的膨胀率（LS平均值= 21%）明显低于后续喂养（LS平均值= 95-98%）（p<0.0001）。Hemotek（LS平均值= 78%）的膨胀率明显低于Caserotek设备（LS平均值= 92%）或玻璃喂料器（LS平均值= 91%）（p<0.0001）。使用 Hemotek 设备观察到的较低饲喂率可以通过第 1 天饲喂的差异来解释;只有26%的人用Hemotek喂食，而卡塞罗泰克为72%，玻璃喂食器为75%（p<0.0001）（图4）。

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表 2. 完整的一般线性模型 （GLM） 结果，用于将蚊子暴露于血液中 1 小时后，喂食日和设备对充血率的影响。

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图4. 埃及伊蚊实验 2 的按天和设备划分的交互作用图喂养速率。

开圈表示单个重复，而线表示平均喂食速率。

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生存。

这三种设备的存活率总体非常高，几乎相同，Hemotek、玻璃喂料器和Caserotek设备的存活率分别为99.7%（±11.8%）、99.8%（±0.48%）和99.9%（±0.31%）。

产蛋。

产蛋量因实验周（p = 0.0062）和所用设备（p<0.0001）而异（表3和S2文件）。产卵量在第3周最高（见图4）。总的来说，Ae。使用Caserotek装置喂养的埃及伊蚊每只雌性（32±1.6）产生的卵明显多于Hemotek（21.1）或玻璃喂食器（6±±22.1）（LS平均值，p≤6.0）（图0002）。

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表 3. 初始血液喂养后（1小时持续时间）和装置后取卵周对每只蚊子产卵数量的影响的完整一般线性模型（GLM）结果。

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图5. 每个雌性埃及伊蚊的卵（按周）和喂养装置。

误差线表示 95% 置信区间。

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实验3

喂食率。

在1小时期间，女性安。为达林基提供血液，在实验周和使用的装置中，喂养率相对一致。有强有力的证据表明一周*设备相互作用（df = 4，f 值 4.91，p = 0.0089）;这些变量占 GLM 模型（S62 文件）数据变异的 2%（R 平方）。虽然没有统计学意义，但Caserotek（81%±12.0%）的充血率高于玻璃喂料器（72%±10.8%）或Hemotek设备（75%±11.0%）的肿胀率。仅在第3周，Caserotek（LS平均值= 89%）和Hemotek（LS平均值= 61%）的喂食率之间存在显着差异，而玻璃喂食器的喂食率介于两者之间（LS平均值= 74%）。

产蛋量和孵化率。

每安产卵。Darlingi，雌性在Hemotek和Caserotek设备中分别为11.6至14.3个卵/雌性。玻璃喂料器的孵化率较低（69%），Hemotek的孵化率最高（83%）;然而，这些差异都没有统计学意义。补充信息（S2 文件）中提供了完整的模型结果。

讨论

在本文中，我们将我们的卡塞罗泰克血液喂养系统与更常用的玻璃膜喂食器和用于维持蚊群的 Hemotek 血液喂养系统进行了比较。总体而言，Caserotek 设备在测量的两个 Ae 的所有参数中表现与或优于其他设备。埃及伊蚊和安。达林吉。Ae的摄食率明显较高。在所有实验中，埃及伊蚊比其他设备发生得更快。此外，Ae.埃及伊蚊平均每只雌性产生比其他设备更多的卵子。

总体而言，Caserotek观察到的喂养，繁殖力和存活率与其他研究和设备观察到的一致，后者因所使用的设备，膜和方法而异。例如，使用Glytube喂食器时，羊肠膜的充血率从38%到水管工胶带的63%不等，与Caserotek装置使用的膜相同[13]。在另一项比较 An 喂养率的研究中。在Hemotek和玻璃喂养装置上跨不同膜的coluzzii，平均喂养率分别为49%和42%[14]。在可用的已公布设备中，与Caserotek最相似的是由Siria等人开发的设备[15]，它使用聚苯乙烯泡沫塑料杯和聚四氟乙烯（PTFE）胶带作为膜。对于 A，他们的设备馈送率为 100%。埃及伊蚊，99%为安。冈比亚，86%为安。阿拉伯蕨食20分钟。卡塞罗泰克的繁殖力估计大约是Siria装置的两倍;然而，跨研究的比较总是很困难，因为饲养条件可能会有所不同。这两种设备都能够通过简单地监测水温并在必要时添加更多的温水来保持血液温暖。这两种设备之间的主要区别在于一种是完全一次性的，而Caserotek设备在洗涤和灭菌后可以重复使用。此外，我们发现在最初使用封口膜作为膜后，使用PTFE胶带是一个主要优势。虽然PTFE尚未被广泛使用，但在头与头比较中，PTFE的喂养率高于其他动物膜或封口膜膜[13，15]。

有趣的是，当喂食时间较短时，卡塞罗泰克似乎是有利的，当蚊子年轻时表现得特别好（在我们的例子中是第一次喂食）。在初始喂食期间，Caserotek 相对于其他设备的明显优势表明，该设备的某些特性比其他设备更快地刺激血液喂养。同样值得注意的是，即使提供了额外的喂食时间，Hemotek设备的喂食率也低于其他两个设备。

Caserotek 很容易用秘鲁伊基托斯的当地材料建造，而且价格低廉（每台设备~5.00 美元）。此外，该设备易于使用且实用。在资源匮乏的环境中，它可以用于屠宰场或屠宰场可供血液使用的情况，也可以在没有电力的地方使用。唯一的要求是温度计和烧开水的能力。从 2015 年到 2019 年，Caserotek 用于确保 500 只雌性 AE 的可用性。每周埃及伊蚊用于直接喂养实验，以研究活动性登革热病例的病媒能力[16]。

Caserotek 在大规模饲养蚊子或使用病原体感染血液方面的可扩展性需要额外的测试。我们估计，一个人可以轻松地同时管理30个设备，同时在30个笼子上管理30个设备，方法是向每个设备交错添加血液和热水。热水将每隔<>分钟更换一次。我们不建议Caserotek为大规模释放计划生产蚊子，相反，该设备可以在大多数环境中促进蜂群维护。使用病原体感染的血液进行病媒能力实验可能需要在使用后处理设备并分析这样做的成本效益。

研究局限性

埃及伊蚊实验是在加州大学戴维斯分校的现场实验室进行的，没有严格的温度和湿度控制。虽然该设施有空调，但该设施没有良好的温度调节。加州大学戴维斯分校昆虫馆是低资源环境中设施的代表，在许多方面都是典型的室内环境Ae。埃及伊蚊在这个登革热传播流行城市茁壮成长[17-20]。因此，在实际条件下评估这些设备是合理的。实验#1的结果受到进一步纳入未喂食蚊子的限制，导致在我们的案例中，第7天和第14天时间点的血液喂养设备之间的比较不平衡，但其他人使用的研究设计[4]。另一个限制是没有评估按蚊实验中的生存率。

结论

Caserotek 代表了一种实用、经济高效的人工血液喂养设备，适用于资源匮乏的环境。它已被证明对蚊子生产有效，并有可能与病原体感染的血液一起用于媒介能力实验。

版权声明

有些作者是美国政府的军人和雇员。这项工作是作为其公务的一部分而准备的。《美国法典》第17篇第105条规定，“美国政府的任何作品均不享有本标题下的版权保护。标题 17 U.S.C. 101 将美国政府工作定义为由军人或美国政府雇员准备的工作，作为该人公务的一部分。

免責聲明

本文中表达的观点反映了作者的研究结果，并不一定反映海军部、国防部或美国政府的官方政策或立场。

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制备用于埃及伊蚊和达令按蚊人工血液喂养的装置Caserotek。

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S1 图 制备用于埃及伊蚊和达令按蚊人工血液喂养的装置Caserotek。

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0011563.s001

（提夫）

S2 图 使用卡塞罗泰克献血装置对埃及伊蚊和达林按蚊进行人工血液喂养。

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0011563.s002

（提夫）

S3 图 使用Hemotek对埃及伊蚊和达林按蚊进行人工血液喂养。

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0011563.s003

（提夫）

S4 图 用玻璃膜喂食器对埃及伊蚊和达林按蚊进行人工血液喂养。

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0011563.s004

（提夫）

S5 图 实验#1的研究设计。

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0011563.s005

（JPG）

S6 图 实验#2的研究设计。

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0011563.s006

（JPG）

S7 图 实验#3的研究设计。

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0011563.s007

（JPG）

S8 图 埃及伊蚊进食血液30分钟后的存活曲线。

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0011563.s008

（蒂夫）

S1 文件。 埃及伊蚊菌落的标准操作程序和维护。

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0011563.s009

（英文）

S2 文件。 实验 #1-#3 的一般线性模型输出。

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0011563.s010

（英文）

S3 文件。 用于饲喂率、存活率和产蛋量分析的主要数据集采用 excel 格式。

数据文件包括每种分析类型的单独选项卡以及数据字典。

https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0011563.s011

（三十）

引用

1.Romano D， Stefanini C， Canale A， Benelli G. 蚊子和蜱虫的人工喂血器——从哪里来，从哪里去？热带学报 2018;183： 43–56.

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2.斯里寅， 翁世昌， 萧世华， 涂文昌.一种用于登革热媒介蚊子的血液喂养、口腔感染和唾液采集的简化方法。公共图书馆一号。2020;15： e0233618.密码：32469954

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